Calidad microbiológica: detección de Aeromonas sp y Pseudomonas sp en garrafones provenientes de pequeñas plantas purificadoras de agua / Microbiological quality: detection of Aeromonas sp and Pseudomonas sp in jugs from small water purification establishments

RESUMEN Las plantas purificadoras de agua que carecen de un adecuado sistema de control de calidad pueden generar problemas de salud pública. El objetivo de este estudio fue examinar la calidad microbiológica del agua proveniente de pequeñas plantas purificadoras de la ciudad de Puebla, así como, determinar la existencia de bacterias Aeromonas sp y Pseudomonas sp, y caracterizar si presentan un fenotipo patógeno oportunista. Se recolectaron 70 muestras de garrafones de agua de 25 establecimientos. La cuantificación bacteriana se realizó mediante el método de goteo en placa. Se comprobaron los géneros microbianos mediante análisis bioquímico. En las cepas que mostraron discrepancia se utilizó la identificación molecular con base a secuencias parciales del gen 16S rRNA para confirmar su especie y se les evaluaron sus características de patogenicidad: multirresistencia a antibióticos, producción de biopelícula y actividad hemolítica. El 40 % de las plantas purificadoras no cumplieron con la calidad microbiológica del agua para consumo humano. El 41.4 % de los garrafones de agua muestreados incumplió la normativa, presentando coliformes totales 35.7 %, Pseudomonas 30 %, Enterococcus faecalis 8.6 % y bacterias coliformes fecales el 5.7 %. Se obtuvieron 56 aislados, provenientes de los 29 garrafones contaminados; 10 de ellos se caracterizaron molecularmente, resultando 7 aislados relacionados con especies diferentes de P. aeruginosa y 3 con especies de Aeromonas. De los aislados de Pseudomonas, 5 presentaron resistencia a 2 familias de antibióticos y 2 mostraron multirresistencia. El 36 % de los 10 aislados produjeron hemólisis y biopelícula. Dos cepas de Aeromonas mostraron resistencia a Cefalosporina 3a generación pero no produjeron hemólisis. Los 10 aislados analizados fueron clasificados como no patógenos. Es necesario un seguimiento sanitario más estricto para lograr el cumplimiento de las normas nacionales e internacionales relacionadas con el consumo de agua purificada, para evitar dañar la salud de los consumidores.

ABSTRACT Water purification establishments that lack an adequate quality control system can cause public health problems. The objective of this study was to examine the microbiological quality of water from small purification establishments in the city of Puebla, as well as to determine the existence of Aeromonas sp and Pseudomonas sp bacteria, and to characterize whether they present an opportunistic pathogenic phenotype. 70 water jug samples were collected from 25 establishments. Bacterial quantification was performed using the drop plate method. Microbial genera were determined by biochemical analysis using the standard methodology. In the strains that showed discrepancy, molecular identification based on partial sequences of the 16S rRNA gene was used to confirm their species, and their pathogenic characteristics were evaluated: multiresistance to antibiotics, biofilm production, and hemolytic activity. The results showed that 40 % of the purification establishments did not comply with the microbiological quality of water for human consumption. Similarly, 41.4 % of the jugs of water sampled failed to comply with the regulations, presenting total coliforms 35.7 %, Pseudomonas 30 %, Enterococcus faecalis 8.6 % and fecal coliform bacteria 5.7 %. Likewise, 56 isolates were obtained from the 29 contaminated jugs, of which 10 were molecularly characterized, resulting in 4 different species for P. aeruginosa and 3 for Aeromonas. Of the 7 Pseudomonas isolates, 5 presented resistance to 2 families of antibiotics and 2 showed multiresistance. In total, 36 % of the 10 isolates produced hemolysis and biofilm. Two Aeromonas strains showed resistance to 3rd generation Cephalosporin but did not produce hemolysis. The 10 isolates analyzed were classified as non-pathogenic. A stricter sanitary monitoring is necessary to achieve compliance with national and international standards related to the consumption of purified water, to avoid harming the health of consumers.

Salivary Streptococcus mutans colony-forming unit count in patients with and without orthodontic appliances / Recuento de unidades formadoras de colonias de Streptococcus mutans salivares en pacientes con y sin aparatología ortodóntica

ABSTRACT Orthodontic appliances promote the accumulation of biofilm in the oral cavity and increase counts of Streptococcus mutans (S. mutans). However, there are few comparative studies of the effects generated by the interaction of saliva and microorganisms in absence and presence of orthodontic appliances. Aim: The aim of this study was to determine the S. mutans colony-forming unit count (CFU/mL) in participants with and without fixed orthodontic appliances. Materials and Method: It was an observational cross-sectional study on 21 participants, all over 18 years of age, non-smokers, without removable oral appliances, who had not been under antibiotic treatment within the previous three months. Sociodemographic variables, oral hygiene habits, S. mutans CFU/mL count, and salivary pH were assessed. Saliva samples were collected, and the data was analyzed using Fisher's exact and Kruskal Wallis tests. A p-value<0.05 was considered statistically significant. Results: Fourteen (66.7%) of the participants were female; average age was 20.4 ± 2.2 years. The group without fixed orthodontic appliances had the highest salivary S. mutans CFU/mL count (Me: 56.0×103, IQR: 9.2×103 - 75.5×103), but there was no statistically significant difference between groups (p=0.7459). There was a statistically significant difference in salivary pH, with the metal orthodontic appliance group having the lowest pH (p=0.0478). No statistically significant difference in salivary S. mutans CFU/mL count was found between groups. Salivary pH was lower in the group with metal appliances than in the groups with non-metal appliances and without appliances.

RESUMEN Se ha reportado que la aparatología ortodóntica promueve la acumulación de biofilm en la cavidad bucal y aumenta los recuentos bacterianos de Streptococcus mutans (S. mutans). Sin embargo, los estudios comparativos sobre los efectos generados por la interacción de la saliva y los microorganismos en ausencia y presencia de aparatología ortodóntica son limitados. Determinar el recuento de Unidades Formadoras de Colonias (UFC/mL) de S. mutans en participantes con y sin aparatología ortodóntica fija. Materiales y Método: se realizó un estudio observacional de corte transversal con 21 participantes, todos mayores de 18 años, no fumadores, sin ningún tipo de aparatología oral removible y sin antecedentes de tratamiento antibiótico en los tres meses previos. Se evaluaron variables sociodemográficas, hábitos de higiene oral, recuento de UFC/mL de S. mutans y pH salival. Se recolectaron muestras salivales y los datos se analizaron mediante las pruebas Exacto de Fisher y Kruskal Wallis. Un valor de p ≤0,05 se consideró estadísticamente significativo. Resultados: participaron catorce (66,7%) mujeres; la edad promedio fue de 20.4 ± 2.2 años. El grupo sin ortodoncia fija presentó el mayor recuento de UFC/mL de S. mutans salival (Me: 56,0×103, RIC: 9,2×103 - 75,5×103), pero no hubo una diferencia estadísticamente significativa entre los grupos (p=0,7459). Con relación al pH salival, se observó una diferencia estadísticamente significativa, siendo el grupo de ortodoncia metálica el que presentó el pH más bajo (p=0,0478). Aunque no se encontró una diferencia estadísticamente significativa en el recuento de UFC/mL de S. mutans salival entre los grupos, el pH salival del grupo de aparatología metálica fue más bajo en comparación con los grupos no metálicos y sin aparatología.

Salmonella entérica serovar Enteritidis biofilm lifestyle induces lower pathogenicity and reduces inflammatory response in a murine model compared to planktonic bacteria / Salmonella entérica serovar Enteritidis en biopelícula induce una menor patogenicidad y respuesta inflamatoria en un modelo murino que su contraparte planctónica

Abstract Salmonella enterica serovar Enteritidis (S. Enteritidis) is the most frequent serovar involved in human salmonellosis. It has been demonstrated that about 80% of infections are related to biofilm formation. There is scant information about the pathogenicity of S. Enteritidis and its relationship to biofilm production. In this regard, this study aimed to investigate the differential host response induced by S. Enteritidis biofilm and planktonic lifestyle. To this purpose, biofilm and planktonic bacteria were inoculated to BALB/c mice and epithelial cell culture. Survival studies revealed that biofilm is less virulent than planktonic cells. Reduced signs of intestinal inflammation and lower bacterial translocation were observed in animals inoculated with Salmonella biofilm compared to the planktonic group. Results showed that Salmonella biofilm was impaired for invasion of non-phagocytic cells and induces a lower inflammatory response in vivo and in vitro compared to that of planktonic bacteria. Taken together, the outcome of Salmonella-host interaction varies depending on the bacterial lifestyle.

Resumen Salmonella entérica serovar Enteritidis (S. Enteritidis) es la serovariedad más frecuentemente aislada en la salmonelosis humana. Se ha demostrado que alrededor del 80% de las infecciones están relacionadas con la formación de biopelículas. Sin embargo, la información disponible acerca de la patogenicidad de S. Enteritidis y su relación con la producción de biopelículas es escasa. Este trabajo tuvo como objetivo investigar la respuesta diferencial del huésped frente a S. Enteritidis en sus 2 estilos de vida: biopelícula y planctónico. Para ello, se inocularon bacterias en estado de biopelícula o planctónico en ratones BALB/c y cultivo de células epiteliales. Los estudios de supervivencia revelaron que Salmonella en biopelícula fue menos virulenta que su contraparte planctónica. Los animales inoculados con biopelículas presentaron una mayor conservación estructural del intestino y una menor translocación bacteriana que el grupo planctónico. Asimismo, Salmonella en biopelícula mostró una capacidad deficiente para invadir células no fagocíticas e indujo una menor respuesta inflamatoria in vivo e in vitro que las bacterias planctónicas. Se concluye que el resultado de la interacción Salmonella-huésped depende del estilo de vida bacteriano.

Capacidade de formação de biofilmes e perfil de resistência de Acinetobacter baumannii isolados em unidades de terapia intensiva: uma revisão sistemática

Introdução: Acinetobacter baumanni é um cocobacilo Gram negativo responsável por elevadas taxas de infecções relacionadas à assistência à saúde (IRAS). Apresenta alto nível de resistência intrínseca a antimicrobianos, além da capacidade de adquirir resistência a carbapenêmicos e polimixinas. Ainda, A. baumannii possui habilidade para produzir biofilmes em superfícies abióticas e bióticas, o que favorece a infecção de pacientes gravemente enfermos internados em unidades de terapia intensiva (UTI). Deve ser ressaltado que bactérias envolvidas em biofilmes apresentam maior resistência aos antimicrobianos, atribuída a fatores bioqúmicos, moleculares e as condições dos hospedeiros, o que dificulta o tratamento dessas infecções. Objetivos: Avaliar a produção de biofilme por isolados de A. baumannii recuperados de pacientes internados em UTIs, bem como operfil de susceptibilidade a antimicrobianos (aminoglicosídeos, tigeciclina, carbapenêmicos e polimixinas) entre esses isolados. Métodos: Foi realizada uma revisão sistemática de acordo com os critérios Prisma nos bancos de dados Pubmed/Medline, Scopus, Lilacs, Scielo, e Web of Science. Resultados: Foram incluídos um total de 12 artigos que avaliaram 1006 isolados clínicos de A. baumannii, os quais todos foram resistentes aos carbapenê-micos. No entanto, a maioria dos isolados permaneceu sensível as polimixinas B e E(94,46%). A porcentagem dos isolados produtores de biofilme foi alta (96,3%), e neste estudo não fica clara a relação entre a habilidade de produzir biofilmes e a resistência aos antimicrobianos analisados. Conclusão: Mais estudos devem ser conduzidos para monitorar a resistência aos antimicrobianos em A. baumannii, sobretudo em produtores de biofilme, visto que o manejo terapêutico das infecções ocasionadas por essas linhagens torna-se mais complexo e desafiador.

SUMMARY Introduction: Acinetobacter baumanni is a Gram-negative coccobacillus responsible for high rates of healthcare-related infections (HAI). It has a high level of intrinsic resistance to antimicrobials, in addition to the ability to acquire resistance to carbapenems and polymyxins. Furthermore, A. baumannii has the ability to produce biofilms on abiotic and biotic surfaces, which favors the infection of critically ill patients admitted to intensive care units (ICU). It should be noted that bacteria involved in biofilms have greater resistance to antimicrobials, attributed to biochemical and molecular factors and the conditions of the hosts, which makes the treatment of these infections difficult. Objectives: To evaluate the biofilm production by A. baumannii isolates recovered from ICU patients, as well as the antimicrobial susceptibility profile (aminoglycosides, tigecycline, carbapenems and polymyxins) among these isolates. Methods: A systematic review was performed according to PRISMA criteria in the PUBMED/MEDLINE, Scopus, LILACS, SciELO, and Web of Science databases. Results: A total of 12 articles that evaluated 1006 clinical isolates of A. baumannii, all of which were resistant to carbapenems, were included. However, most isolates remained sensitive to polymyxins B and E (94.46%). The percentage of biofilm-producing isolates was high (96.3%), and in this study the relationship between the ability to produce biofilms and resistance to the analyzed antimicrobials is not clear. Conclusion: More studies should be conducted to monitor antimicrobial resistance in A. baumannii, especially in biofilm producers, as the therapeutic management of infections caused by these strains becomes more complex and challenging.

Introducción: Acinetobacter baumanni es un cocobacilo gramnegativo responsable de altas tasas de infecciones relacionadas con la salud. Tiene un alto nivel de resistencia intrínseca a los antimicrobianos, además de la capacidad de adquirir resistencia a los carbapenémicos y polimixinas. Además, A. baumannii tiene la capacidad de producir biopelículas en superficies abióticas y bióticas, lo que favorece la infección de pacientes críticos ingresados en unidades de cuidados intensivos (UCI). Cabe señalar que las bacterias involucradas en biofilms tienen mayor resistencia a los antimicrobianos, atribuida a factores bioquímicos y moleculares y a las condiciones de los hospedadores, lo que dificulta el tratamiento de estas infecciones. Objetivos: Evaluar la producción de biofilm por aislamientos de A. baumannii recuperados de pacientes de UCI, así como el perfil de susceptibilidad antimicrobiana (amino-glucósidos, tigeciclina, carbapenémicos y polimixinas) entre estos aislamientos. Métodos: Se realizó una revisión sistemática según los criterios Prisma en las bases de datos Pubmed / Medline, Scopus, Lilacs, SciELO y Web of Science. Resultados: Se incluyeron un total de 12 artículos que evaluaron 1006 aislamientos clínicos de A. baumannii, todos ellos resistentes a carbapenémicos. Sin embargo, la mayoría de los aislados permanecieron sensibles a las polimixinas B y E (94,46%). El porcentaje de aislamientos productores de biopelículas fue alto (96,3%), y en este estudio no está clara la relación entre la capacidad de producir biopelículas y la resistencia a los antimicrobianos analizados. Conclusión: Se deben realizar más estudios para monitorear la resistencia a los antimicrobianos en A. baumannii, especialmente en productores de biopelículas, ya que el manejo terapéutico de las infecciones causadas por estas cepas se vuelve más complejo y desafiante.

Avaliação do efeito antiaderente dos óleos essenciais de Eucalyptus globulus e Eucalyptus citriodora contra cepa de Staphylococcus aureus

Introdução: O biofilme dental é uma estrutura complexa formada a partir da adesão de variadas células microbianas à película adquirida sobre a estrutura dentária. Essas células se aderem umas às outras enquanto sintetizam uma matriz extracelular, tornando-se uma comunidade altamente organizada, o que dificulta sua remoção e promove uma resistência aos antimicrobianos. A presença de Staphylococcus aureus no biofilme oral pode causar um desequilíbrio na microbiota facilitando o início de um processo de doença. Objetivo: Avaliar a capacidade antiaderente do Eucalyptus globulus e Eucalyptus citriodora contra cepas de Staphylococcus aureus. Resultados: Foi possível observar que o óleo essencial de Eucalyptus globulus inibiu a formação do biofilme com uma concentração inibitória mínima de aderência (CIMA) semelhante ao digluconato de clorexidina 0,12 %, ambos de 1:8. O óleo essencial de Eucalyptus citriodora não impediu a aderência bacteriana às paredes do tubo em nenhuma concentração avaliada. Conclusão: Que apenas o óleo essencial da espécie Eucalyptus globulus possui atividade antiaderente contra Staphylococcus aureus, podendo ser utilizado como produto alternativo para controle do biofilme.

SUMMARY Introduction: Dental biofilm is a complex structure formed from the adhesion of various microbial cells to the film acquired on the dental structure. These cells adhere to each other while synthesizing an extracellular matrix, becoming a highly organized community, which makes it difficult to remove and promotes resistance to antimicrobials. The presence of Staphylococcus aureus in the oral biofilm can cause an disturb in the microbiota, facilitating the beginning of a disease process. Aim: To evaluate the non-adherent ability of Eucalyptus globulus and Eucalyptus citriodora against Staphylococcus aureus strains. Results: It was possible to observe that the essential oil of Eucalyptus globulus inhibited the formation of the biofilm with a Minimum Adhesive Inhibitory Concentration (MAIC) similar to 0.12 % chlorhexidine digluconate, both of 1:8. The essential oil of Eucalyptus citriodora did not prevent bacterial adherence to the tube walls in any evaluated concentration. Conclusion: Only the essential oil of the species Eucalyptus globulus has non-adherent activity against Staphylococcus aureus and can be used as an alternative product to control the biofilm.

Introducción: La biopelícula dental es una estructura compleja formada por la adhesión de varias células microbianas a la película adquirida en la estructura del diente. Estas células se adhieren entre sí mientras sintetizan una matriz extracelular, convirtiéndose en una comunidad altamente organizada, lo que dificulta su eliminación y promueve la resistencia a los antimicrobianos. La presencia de Staphylococcus aureus en el biofilm oral puede provocar un desequilibrio en la microbiota facilitando el inicio de un proceso patológico. Objetivo: Evaluar la capacidad antiadherente de Eucalyptus globulus y Eucalyptus citriodora frente a cepas de Staphylococcus aureus. Resultados: Se pudo observar que el aceite esencial de Eucalyptus globulus inhibió la formación de biopelículas con una concentración mínima inhibidora de adhesión (CIMA) equivalente al 0,12 % de gluconato de clorhexidina, ambos de 1:8. El aceite esencial de Eucalyptus citriodora no previno la adhesión bacteriana a las paredes del tubo en ninguna concentración evaluada. Conclusión: Que solo el aceite esencial de la especie Eucalyptus globulus tiene actividad anti-adherente contra Staphylococcus aureus, y puede usarse como producto alternativo para el control de biopelículas.

Susceptibility to Vancomycin of Biofilm Producing Staphylococci Isolated from Tertiary Care Hospital of Nepal / Susceptibilidad a la vancomicina de estafilococos productores de biopelículas aislados del hospital de atención terciaria de Nepal

Background: Methicillin resistance and biofilm-producing Staphylococci are emerging as multidrug-resistant strains narrowing the efficacy of antimicrobial therapy. Although vancomycin is used as the drug of choice to treat such isolates, different studies worldwide have documented the emergence of strains that are intermediately susceptible or resistant to this antibiotic. Objective: The study aimed to determine the minimum inhibitory concentration of vancomycin to methicillin-resistant and biofilm-producing staphylococci isolated from different clinical specimens. Methods: 375 staphylococci isolated from different clinical specimens over one year were included in the study. Biofilm formation was determined by the Tissue culture plate method (TCP), and ica genes were identified by Polymerase Chain Reaction (PCR). Antibiotic susceptibility and methicillin resistance were done following Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelines. The minimum inhibitory concentration (MIC) of vancomycin in all isolates was determined by the agar dilution method. Results:Among 375 Staphylococci studied, 43% and 57% represented S. aureus and Coagulase-Negative Staphylococci (CNS), respectively. The rate of Methicillin-Resistant S. aureus (MRSA) and Methicillin-Resistant Coagulase Negative Staphylococci (MRCNS) were 81.4% and 66.8% respectively and determined by the disc diffusion method. The most potential antibiotics were tetracycline and chloramphenicol showing sensitivity to more than 90% isolates. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) value of oxacillin for staphylococci ranged from 0.125-32 µg/ml. Oxacillin agar diffusion method showed 51.6% and 79.9% isolates as MRSA and MRCNS, respectively, revealing a very high percentage of S. aureus and CNS isolates as methicillin-resistant. All isolates had susceptible vancomycin MICs that ranged from 0.125-2 µg/ml. Two S. aureus isolated from Central Venous Catheter (CVC) and catheter specimens were detected with intermediate susceptibility to vancomycin. Similarly, three CNS isolated from blood, CVC, and wound/pus (w/p) were intermediately susceptible to vancomycin. Strong biofilm formation was observed in 22.1% of clinical isolates, and the ica gene was detected among 22.9% of isolates. Only one S. aureus detected as a biofilm producer by the TCP method was found to have intermediate susceptibility to vancomycin. Conclusions: The increment in vancomycin MIC among methicillin-resistant and biofilm-producing staphylococci is alarming. Strict control measures to prevent methicillin-resistant isolates spread and routine surveillance for vancomycin-resistant isolates must be incorporated in hospitals to prevent antimicrobial treatment failure

Antecedentes: Los estafilococos resistentes a la meticilina y productores de biopelículas están surgiendo como cepas multirresistentes que reducen la eficacia del tratamiento antimicrobiano. Aunque la vancomicina se utiliza como fármaco de elección para tratar dichos aislados, diferentes estudios realizados en todo el mundo han documentado la aparición de cepas intermedias susceptibles o resistentes a este antibiótico. Objetivo: El estudio tenía como objetivo determinar la concentración mínima inhibitoria de la vancomicina para los estafilococos resistentes a la meticilina y productores de biofilm aislados de diferentes muestras clínicas. Métodos: Se incluyeron en el estudio 375 estafilococos aislados de diferentes muestras clínicas durante un año. La formación de biopelículas se determinó mediante el método de la placa de cultivo de tejidos (TCP), y los genes ica se identificaron mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). La susceptibilidad a los antibióticos y la resistencia a la meticilina se realizaron siguiendo las directrices del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). La concentración inhibitoria mínima (MIC) de vancomicina en todos los aislados se determinó por el método de dilución en agar. Resultados:Entre los 375 estafilococos estudiados, el 43% y el 57% representaban S. aureus y estafilococos coagulasa-negativos (ECN), respectivamente. La tasa de S. aureus resistente a la meticilina (SARM) y de estafilococos coagulasa negativos resistentes a la meticilina (ECNM) fue del 81,4% y el 66,8%, respectivamente, y se determinó por el método de difusión de discos. Los antibióticos más potenciales fueron la tetraciclina y el cloranfenicol, que mostraron una sensibilidad superior al 90% de los aislados. El valor de la concentración inhibitoria mínima (CIM) de la oxacilina para los estafilococos osciló entre 0,125-32 µg/ml. El método de difusión en agar de la oxacilina mostró que el 51,6% y el 79,9% de los aislados eran SARM y MRCNS, respectivamente, lo que revela que un porcentaje muy elevado de los aislados de S. aureus y CNS son resistentes a la meticilina. Todos los aislados tenían MIC de vancomicina susceptibles que oscilaban entre 0,125-2 µg/ml. Se detectaron dos S. aureus aislados de muestras de catéteres venosos centrales (CVC) y catéteres con una susceptibilidad intermedia a la vancomicina. Del mismo modo, tres S. aureus aislados de sangre, CVC y herida/pus (w/p) fueron intermedianamente susceptibles a la vancomicina. Se observó una fuerte formación de biopelículas en el 22,1% de los aislados clínicos, y se detectó el gen ica en el 22,9% de los aislados. Sólo un S. aureus detectado como productor de biopelículas por el método TCP resultó tener una susceptibilidad intermedia a la vancomicina. Conclusiones: El incremento de la MIC de vancomicina entre los estafilococos resistentes a la meticilina y productores de biofilm es alarmante. Para evitar el fracaso del tratamiento antimicrobiano, deben incorporarse en los hospitales medidas de control estrictas para prevenir la propagación de los aislados resistentes a la meticilina y una vigilancia rutinaria de los aislados resistentes a la vancomicina

Caries radicular: actualización sobre una patología de creciente interés

La caries radicular es un proceso dinámico de destrucción localizada de las superficies radiculares, dependiente de biopelícula. Esta patología afecta principalmente a la población adulta mayor con superficies radiculares expuestas y altera su calidad de vida. Las vulnerabilidades y multimorbilidades, frecuentes en este grupo de edad, limitan el autocuidado oral y son criterios para considerar en la comprensión y manejo de la patología. El diagnóstico de las lesiones de caries radicular implica conocimiento de la estructura radicular sana, los factores indicadores o de riesgo, los mecanismos de desarrollo de las lesiones y los criterios para su detección y valoración. La elección correcta de opciones de manejo tanto del riesgo como de las lesiones de caries, enfocada en la preservación de la estructura, evidencia la comprensión de la caries radicular. La caries radicular plantea un desafío para la academia, los sistemas de salud, la práctica clínica dental y la población, debido a que sus indicadores están aumentando en relación con el envejecimiento poblacional y la mayor conservación de dientes naturales. El propósito de esta revisión de tema fue presentar el estado del entendimiento actual de caries radicular. Se incluyeron 81 artículos publicados entre 1971 y 2021, sobre embriogénesis de la raíz; prevalencia, etiopatogenia; características de las lesiones; diagnóstico y propuestas de manejo a nivel del riesgo individual y de las lesiones. Esta actualización es pertinente por el reto que conlleva la presencia cada vez mayor de esta patología, junto con sus consecuencias. El planteamiento de su estado del arte sugiere áreas de investigación.

Root caries is a dynamic process of localized destruction of the root surfaces, dependent on the biofilm. Its pathology mainly affects the elderly toothed population with exposed root surfaces and disrupts their quality of life. Vulnerabilities and multimorbidities, frequent in this age group, limit oral self-care and are criteria to be considered in understanding and managing the disease. The root caries lesions diagnosis implies knowledge about the healthy root structure, indicators or risk factors, caries lesions development mechanism, and the detection and assessment criteria. The correct selection of caries risk and management options preserving tooth structure shows the understanding of root caries. The root caries represents a challenge for academia, health systems, dental practice, and the population because its indicators are increasing related to aging population and greater conservation of natural teeth. This review aimed to present the state of the current understanding of root caries. Eighty-one papers published between 1971 and 2021 were included. This considered root embryogenesis; the current understanding of root caries, its prevalence and etiopathogenesis; characteristics of the lesions; diagnosis, and care proposals both at the individual risk level, and at the lesions level. This update is relevant due to the risk that the increasing presence of this pathology carries, together with its consequences. The statement of its state of the art suggests areas of research.

Estudio de la actividad antimicrobiana de Xenophyllum poposum sobre microorganismos de la cavidad bucal por el método de difusión radial / Study of the antimicrobial activity of Xenophyllum poposum on microorganisms of the oral cavity by the radial diffusion method

Resumen En este estudio se evaluó la actividad antimicrobiana in vitro de extractos de Xenophyllum poposum sobre microorganismos bucales como Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus casei, Actinomyces naeslundii, Actinomyces odontolyticus, Candida albicans y Veillonella sp. Se empleó el método de difusión radial en agar y como controles negativo y positivo de inhibición se emplearon etanol y clorhexidina al 0,12% (Plac out NF®) respectivamente. Los extractos con mayor actividad antimicrobiana fueron el etanólico y el clorofórmico. La diferencia entre ambos no fue estadísticamente significativa (p≥0,05). Tampoco se observó diferencia significativa con respecto a la clorhexidina, excepto sobre Veillonella sp., ya que el extracto etanólico presentó halos de inhibición significativamente menores sobre este microorganismo. Esto es importante ya que Veillonella se considera indicador de salud en relación a la caries dental. En base a esto, el extracto etanólico de Xenophyllum poposum podría ser usado como control químico de la biopelícula dental.

Abstract In this study, the in vitro antimicrobial activity of Xenophyllum poposum extracts on oral microorganisms such as Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus casei, Actinomyces naeslundii, Actinomyces odontolyticus, Candida albicans, Veillonella sp. was evaluated. The radial diffusion method in agar was used and 0.12% ethanol and chlorhexidine (Plac out NF®) were used as negative and positive inhibition controls, respectively. The extracts with the highest antimicrobial activity were the ethanolic and chloroform extracts. The difference between the two was not statistically significant (p≥0.05). No significant difference was observed with respect to chlorhexidine, except on Veillonella sp., since the ethanolic extract presented significantly lower inhibition halos on this microorganism. This is important as Veillonella is considered an indicator of health in relation to dental caries. Based on this, the ethanolic extract of Xenophyllum poposum could be used as chemical control of dental biofilm.

Resumo Neste estudo, a atividade antimicrobiana de extratos de Xenophyllum poposum sobre microrganismos orais como Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus casei, Actinomyces naeslundii, Actinomyces odontolyticus, Candida albicans e Veillonella sp. Foi utilizado o método de difusão radial em ágar e etanol 0,12% e clorexidina (Plac out NF®) como controles de inibição negativa e positiva, respectivamente. Os extratos com maior atividade antimicrobiana foram os extratos etanólico e clorofórmio. A diferença entre os dois não foi estatisticamente significativa (p≥0,05). Não foi observada diferença significativa em relação à clorexidina 0,12%, exceto em Veillonella sp., uma vez que o extrato etanólico apresentou halos de inibição significativamente menores neste microrganismo. Isso é importante, pois a Veillonella é considerada um indicador de saúde em relação à cárie dentária. Com base nisso, o extrato etanólico de Xenophyllum poposum pode ser utilizado como controle químico do biofilme dental.

Enterobacterales productores de carbapenemasas en sifones de lavamanos de una Unidad de Paciente Crítico

Resumen Introducción: Enterobacterales productores de carbapenemasas (EPC) son una importante causa de infecciones asociadas a la atención en salud (IAAS). El principal reservorio de EPC lo constituyen pacientes infectados y colonizados, sin embargo, también se han identificado reservorios ambientales. Objetivo: Detectar la presencia de EPC en los sifones de lavamanos de la unidad de cuidados críticos de pacientes quemados adultos (UPC QMD) y unidad de cuidados críticos de pacientes pediátricos crónicos (UCEP). Método: Se recolectaron cuatro muestras de sifones de los lavamanos ubicados en el interior de las unidades de pacientes en UCEP y 10 de UPC QMD. A las muestras se les realizó estudio fenotípico y molecular para detección de carbapenemasas en el Instituto de Salud Pública de Chile. Resultados: En los sifones estudiados de UCEP no se aislaron cepas de EPC. En UPC QMD, 50% de los sifones estudiados se aislaron cepas de EPC. Conclusiones: En UPC QMD se objetivó la presencia de EPC en una alta proporción de los sifones de lavamanos testeados, lo que demuestra un reservorio ambiental de bacterias multi-resistentes.

Abstract Introduction: Carbapenemase-producing Enterobacterales (CPE) are an important cause of health care associated infections (HAI). The main reservoir is constituted by infected and colonized patients; however, environmental reservoirs have also been identified. Objective: To detect the presence of CPE in the sink traps of the critical care unit for adult burn patients (UPC QMD) and the critical care unit for chronic pediatric patients (UCEP). Material and Method: Four samples of trap were collected from the sinks located inside the patient units at PICU and 10 at UPC QMD. The samples underwent a phenotypic and molecular study for the detection of carbapenemases at the Institute of Public Health of Chile. Results: In the UCEP no EPC strains were isolated. In UPC QMD, CPE was detected in 50% of the traps. Conclusions: In UPC QMD, the presence of CPE was observed in a high proportion of the tested sinks traps, which shows an environmental reservoir of multi-resistant bacteria.

Efecto antimicrobiano de tetraciclina 2% y clorhexidina 0, 12% sobre biofilm dental de pilares de cicatrización / Antimicrobial effect of 2% tetracycline and 0, 12% chlorhexidine on dental biofilm of healing abutments

Objetivo. Comparar el efecto antimicrobiano de la tetraciclina en gel al 2% y de la clorhexidina en gel al 0,12% sobre el biofilm dental de pilares de cicatrización en implantes dentales. Métodos. Estudio experimental en laboratorio, de corte transversal. Se tomaron 25 muestras de biofilm dental presente en los pilares de cicatrización de implantes dentales de la zona en contacto con la mucosa del surco periimplantario de 19 pacientes. Las muestras fueron sembradas en placas Petri con agar Schaedler, a las cuales se les hizo tres pocillos, en uno se colocó tetraciclina en gel al 2%, en otro clorhexidina en gel al 0,12% y en el último agua destilada en cantidades iguales. Las placas Petri fueron incubadas a 37 °C en medio anaerobio por 96 horas luego de los cuales se midieron los halos de inhibición. Resultados. Ambos geles inhibieron el crecimiento de biofilmdental. La tetraciclina en gel al 2% obtuvo mayores diámetros de halos de inhibición que la clorhexidina en gel al 0,12%, con un máximo de 51 mm y 17 mm respectivamente y un mínimo de 21 mm y 10 mm respectivamente, con medias de 35 mm y 12.84 mm respectivamente. Conclusiones. La tetraciclina en gel al 2% tuvo un mayor efecto antimicrobiano en comparación a la clorhexidina en gel al 0,12% sobre el biofilm dental tomado de pilares de cicatrización de implantes dentales.

Objective. To compare the antimicrobial effect of 2% tetracycline gel and 0,12% chlorhexidine gel on the dental biofilm of healing abutments on dental implants. Methods.This was an in vitro experimental cross-sectional study. Twenty-five biofilm samples were taken from the dental biofilm present on the area in contact with mucosa and the peri-implant groove of healing abutments of 19 patients. The samples were sowed in Petri dishes with Schaedler agar, three wells were made with a sterile punch and in each one tetracycline 2% in gel, 0,12% chlorhexidine in gel, and distilled water were placed in equal quantities. Then Petri dishes were incubated at 37 °C in an anaerobic medium for 48 hours after which inhibition halos were measured. Results. Both gels were inhibitors of dental biofilm growth. Tetracycline 2% in gel obtained larger diameters of inhibition halos than chlorhexidine 0,12% in gel, with a maximum of 51 mm and 17 mm respectively and a minimum of 21 mm and 10 mm, with means of 35 mm and 12.84 mm respectively. Conclusions. Tetracycline at 2% in gel had a higher antimicrobial effect than 0,12% in gel chlorhexidine on dental biofilm taken from healing abutments of dental implants.

Impact of the contamination time by Escherichia coli on biofilm formation in surgical instruments / Impacto del tiempo de contaminación por Escherichia coli en la formación de biofilm en instrumentos quirúrgicos / Impacto do tempo de contaminação por Escherichia coli na formação de biofilme em instrumentos cirúrgicos

ABSTRACT Objectives: to evaluate the microbial load and adherence of Escherichia coli in different areas of the surgical instrument surface exposed to experimental contamination over time. Methods: experimental study in which fragments of crile forceps (serrated, rod and rack) were contaminated by immersion in Tryptic Soy Broth, containing 106 CFU/mL of E. coli, for 1, 2, 4, 6, 8, 12 and 24 hours. Microbial load and bacterial adherence were evaluated using microbiological culture and scanning electron microscopy, respectively. Results: there was an increase in the microbial load on the surgical instrument, proportional to the contamination interval, ranging from 102 after 1 hour to 105 CFU/cm2 in 24 hours. The presence of exopolysaccharide was detected after two hours of contamination. Conclusions: microbial load and adhesion of E. coli increased over time, reaching 105 CFU/cm2 after 24 hours of contamination, starting biofilm formation after two hours.

RESUMEN Objetivos: evaluar la carga microbiana y adherencia de Escherichia coli en diferentes áreas de la superficie de instrumento quirúrgico expuesto a la contaminación experimental a lo largo del tiempo. Métodos: estudio experimental en que fragmentos de tenacillas quirúrgicas (sierra, asta y cremallera), contaminados por inmersión en Tryptic Soy Broth, conteniendo 106 UFC/mL de E. coli, por 1, 2, 4, 6, 8, 12 y 24 horas. La carga microbiana y la adherencia bacteriana evaluadas con uso de cultivo y microscopia electrónica de barredura, respectivamente Resultados: verificó aumento de la carga microbiana en el instrumento quirúrgico, proporcional al intervalo de contaminación, variando de 102 tras 1 hora a 105 UFC/cm2 en 24 horas. La presencia de polisacárido detectada tras 2 horas de contaminación. Conclusiones: carga microbiana y adherencia de E. coli aumentaron a lo largo del tiempo, atingiendo 105 UFC/cm2 tras 24 horas de contaminación, iniciándose formación de biopelícula tras 2 horas.

RESUMO Objetivos: avaliar a carga microbiana e a aderência de Escherichia coli em diferentes áreas da superfície de instrumento cirúrgico exposto à contaminação experimental ao longo do tempo. Métodos: estudo experimental em que fragmentos de pinças crile (serrilha, haste e cremalheira) foram contaminados por imersão em Tryptic Soy Broth, contendo 106 UFC/mL de E. coli, por 1, 2, 4, 6, 8, 12 e 24 horas. A carga microbiana e a aderência bacteriana foram avaliadas com uso de cultura microbiológica e microscopia eletrônica de varredura, respectivamente. Resultados: verificou-se aumento da carga microbiana no instrumento cirúrgico, proporcional ao intervalo de contaminação, variando de 102 após 1 hora a 105 UFC/cm2 em 24 horas. A presença de exapolissacarídeo foi detectada após 2 horas de contaminação. Conclusões: carga microbiana e aderência de E. coli aumentaram ao longo do tempo, atingindo 105 UFC/cm2 após 24 horas de contaminação, iniciandose formação de biofilme após 2 horas.

Elimination of an intraradicular biofilm composed of enterococcus faecalis and candida albicans using a negative apical pressure irrigation system / Eliminación de una biopelícula intraradicular compuesta por enterococcus faecalis y candida albicans utilizando un sistema de irrigación de presión apical negativa

Endodontic treatment consists of the cleaning and disinfecting the root canal system, which is achieved using adequate mechanical instru-mentation and chemical irrigation. Endodontic microorganisms are present in root canals in the form of a biofilm, and their elimination ensures the success of endodontic treatment. Irrigation is a key factor contributing to the elimination of this intraconduct biofilm, and different irrigator agents and irrigation techniques, such as irrigation with negative apical pressure, a novel automated irrigation mechanism based on suction intraconduct, have been used. In this study, we evaluated the ability of a negative apical pressure system with different concentrations of sodium hypochlorite and durations to reduce the microbial load. Materials and Methods: An intraradicular biofilm composed of Enterococcus faecalis and Candida albicans was generated during twenty-one days of static culture on one hundred mesio-vestibular roots of upper molars with complex curvatures greater than 30°C, and the roots were classified in six groups with different concentrations and contact times of sodium hypochlorite. Subsequently, the reduction in the microbial load was measured with McFarland scale and the enumeration of colony forming units and was evaluated with scanning electronic microscopy. Results: We observed a significant difference in the reduction of the microbial load prior to instrumentation compared with postinstrumentation between the groups treated with 2.25% and 5.25% NaOCl for 30, 60 and 90 seconds of contact time (p<0.05), but we did not observe differences in the reduction of microbial load between different contact times and concentrations of sodium hypochlorite employed (p>0.05). Conclusion: Negative apical pressure is a good option for irrigation in endodontics, as it allows the passage of the irrigation fluid along the total length of the root canal and produces a better antimicrobial effect.

El tratamiento de endodoncia consiste en la limpieza y desinfección del sistema de conducto radicular, lo que se logra utilizando instrumentación mecánica adecuada y riego químico. Los microorganismos endodónticos están presentes en los conductos radiculares en forma de una biopelícula, y su eliminación asegura el éxito del tratamiento endodóntico. La irrigación es un factor clave que contribuye a la eliminación de esta biopelícula intraconductora, y se han utilizado diferentes agentes irrigadores y técnicas de irrigación, como la irrigación con presión apical negativa, un nuevo mecanismo automatizado de irrigación basado en la intraconducción de succión. En este estudio, evaluamos la capacidad de un sistema de presión apical negativa con diferentes concentraciones de hipoclorito de sodio y duraciones para reducir la carga microbiana. Material y Métodos: Se generó una biopelícula intraradicular compuesta por Enterococcus faecalisy Candida albicans durante veintiún días de cultivo estático en cien raíces mesio-vestibulares de molares superiores con curvaturas complejas superiores a 30°C, y las raíces se clasificaron en seis grupos con diferentes concentraciones y tiempos de contacto de hipoclorito de sodio. Posteriormente, la reducción en la carga microbiana se midió con la escala de McFarland y la enumeración de las unidades formadoras de colonias y se evaluó con microscopía electrónica de barrido. Resultado: Observamos una diferencia significativa en la reducción de la carga microbiana antes de la instrumentación en comparación con la postinstrumentación entre los grupos tratados con NaOCl 2.25% y 5.25% durante 30, 60 y 90 segundos de tiempo de contacto (p<0.05), pero lo hicimos No se observan diferencias en la reducción de la carga microbiana entre los diferentes tiempos de contacto y las concentraciones de hipoclorito de sodio empleado (p>0.05). Conclusión:La presión apical negativa es una buena opción para el riego en endodoncia, ya que permite el paso del líquido de riego a lo largo de todo el conducto radicular y produce un mejor efecto antimicrobiano.

Correspondencia entre el índice de placa y el recuento de Streptococcus mutans y Lactobacillus sp. en una población infantil: Un estudio transversal / Correspondence between plaque index and Streptococcus mutans and Lactabacillus spp. counts in a child population: A cross-sectional study

Antecedentes: La identificación de microorganismos como Streptococcus mutans(SM) y Lactobacillus sp. (LB) es un predictor del desarrollo de caries, sin embargo los métodos de identificación son de acceso limitado por su alto costo. Objetivo:determinar la correlación entre la biopelícula dental medida por el índice de placa bacteriana de (IPB) Silness y Löe modificado y el recuento de SM y LB en niños colombianos en edad preescolar. Este es un estudio descriptivo de corte transversal y correlacional. Materiales y métodos: Se tomaron 202 muestras de niños entre los 3 y 4 años de edad de tres jardines Infantiles de Cali, Colombia, pertenecientes al estrato socioeconómico 1 y 2, evaluados en cuatro tiempos (0, 3, 6 y 9 meses). Resultados: Hubo una correlación entre el IPB más alto y el mayor recuento de unidades formadoras de colonia de SMsólo a los 3 meses (p = 0,003*). Los recuentos de LB fueron homogéneos en todos los niños y no presentaron correlación con el IPB. Conclusión: Se observaron resultados mixtos sobre la relación entre IPB y los recuentos de SM presentes en la saliva, por lo cual se requiere un análisis de múltiples factores.

Background:The identification of microorganisms such as Streptococcus mutans(SM) and Lactobacillusspp. (LB) is a predictor of the development of caries, however the identification methods are of limited access due to their high cost. Aim:To determine the correlation between the dental biofilm measured by the modified Silness and Löe dental plaque index (DPI)) and the SM and LB count, in preschool children from Colombia. Materials and methods: This is a descriptive cross-sectional and correlational study. We took202 samples from children between 3 and 4 years of age from three kindergartens in Cali, Colombia, belonging to socioeconomic stratum 1 and 2, evaluated at four times (0, 3, 6 and 9 months). Results: We found a correlation between the highest IPB and thehighest count of SM colony forming units only at 3 months (p = 0.003*). LB counts were homogeneous in all children and there was no correlation with IPB. Conclusion: We observed mixed results on the relationship between IPB and the counts of SM present in the saliva, therefore an analysis of multiple factors is required.KEY WORDSDental plaque;Streptococcus mutans;Lactobacillus spp;dental caries.1

Staphylococcus aureus: generalidades, mecanismos de patogenicidad y colonización celular / Staphylococcus aureus: generalities, mechanisms of pathogenicity and cell colonization

Resumen Staphylococcus aureus se caracteriza por ser la principal causa de bacteriemia nosocomial en el mundo, debido al incremento en la resistencia, a los diferentes factores de patogenicidad y virulencia y la expresión de una gran variedad de proteínas las cuales pertenecen a las moléculas de la matriz adhesiva (MSCRAMM), presentes en la superficie de la bacteria cuya función es la colonización e invasión celular al hospedero y favorecer la formación de biopelícula, El conjunto de estos mecanismos de patogenicidad y virulencia, le permiten a la bacteria persistir en el huésped y en el ambiente, sobreviviendo a factores adversos, al sistema inmune y a los antimicrobianos.

Abstract Staphylococcus aureus is a microorganism characterized by being the main cause of nosocomial bacteremia in different places of the world, due to the different virulence and pathogenicity factors. One of the most important is the biofilm formation, which greatly favors bacterial resistance. For the adhesion of the biofilm to biotic and abiotic surfaces, the microbial surface components recognizing adhesive matrix molecules (MSCRAMM), these proteins play a key role in host cell colonization and invasion by the bacteria.

Microbiological study of the subgingival biofilm in HIV+/HAART patients at a specialized dental service / Estudio microbiológico del biofilm subgingival de pacientes VIH+ bajo TARGA en un servicio dental especializado

ABSTRACT The aim of this study was to describe the microbiological profile of HIV patients under highly active antiretroviral treatment (HAART). This crosssectional study comprised 32 HIV patients with periodontal disease (PD) who had been under HAART for more than 6 months. Information about the patients' medical history was obtained from clinical records. Clinical dental examination was performed by a calibrated researcher using standard dental instruments to determine probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), and bleeding on probing (BOP). A total 4,765 periodontal sites were evaluated, 125 of which were also studied microbiologically. Subgingival biofilm samples were obtained using sterile paper points; one set was used for microbiological culture studies and the other for endpoint PCR. Statistical analysis was performed using KruskalWallis and posthoc DunnBonferroni contrast tests. All participants were on HAART at the time of the study, and 90.6% had a viral load below 50 copies/mm3. Prevalence of periodontally active sites was low in the study population. Microbiological studies: Black pigmented anaerobic bacteria and fusiform CFU counts were significantly higher in samples from sites with BOP and PD ≥4mm (p 0.020 and p 0.005, respectively). Molecular Assays: Detection of Porphyromonas gingivalis (p 0.002), Tannerella forsythia (p 0.023) and Treponema denticola (p 0.015) was significantly more frequent at sites with BOP and PD ≥4mm. Conclusions: The patients living with HIV/AIDS under HAART studied here had low prevalence of clinical periodontal disease signs. However, significant detection of P. gingivalis, T. denticola, and T. forsythia in periodontal active sites, and the involvement of these microorganisms as potential HIV reactivators, show the importance of creating awareness among dental health professionals of the need for close dental and periodontal monitoring in HIV patients.

RESUMEN El objetivo de este estudio fue describir el perfil microbiológico del biofilm subgingival de los pacientes con VIH bajo tratamiento antirretroviral de alta actividad (TARGA). El estudio comprendió a 32 pacientes VIH seropositivos con enfermedad periodontal (EP) que se encontraran en tratamiento con TARGA por más de 6 meses. Los antecedentes médicos de los pacientes se obtuvieron de las historias clínicas. El examen clínico instrumental (profun didad de sondaje (PS), nivel de inserción clínico (NIC) y sangrado al sondaje (SS)) fue realizado con instrumental odontológico estándar por un investigador calibrado. De este modo, se evaluaron un total de 4.765 sitios periodontales de los cuales 125 fueron estudiados microbiológicamente. Las muestras de biope lícula subgingival se obtuvieron empleando conos de papel estéril. Las muestras se emplearon en estudios microbiológicos y moleculares por PCR de punto final. El análisis estadístico se realizó según KruskalWallis y pruebas de contrastes posthoc de DunnBonferroni. El 90,6% de la población en estudio presentó carga viral inferior a 50 copias/mm3. La prevalencia de sitios periodontales activos fue baja (1%). Los recuentos de bacterias anaerobias estrictas pigmentadas de negro y fusiformes fueron significativamente más altos en muestras de sitios periodontales con SS positivo y PS ≥4 mm (p 0.020 y p 0.005). La detección molecular de Porphyromonas gingivalis (p 0.002), Tannerella forsythia (p 0.023) y Treponema denticola (p 0.015) fue significativamente mayor en los sitios con SS y PS ≥4mm. La prevalencia del 1% de enfermedad periodontal en el grupo de pacientes estudiados fue menor a la esperada, sin embargo; la detección significativa de P. gingivalis, T. denticola y T. forsythia en sitios periodontales activos y su potencial participación como agentes reactivadores del VIH, nos alerta de la importancia de crear conciencia en los profesionales de la salud (médicos y odontólogos) acerca de la necesidad de un monitoreo minucioso del estado periodontal de pacientes con características semejantes a las descriptas en la muestra poblacional estudiada.

Efectos del medio de cultivo y de la metodología aplicada sobre la formación de biopelículas de 2 cepas de Escherichia coli diarreagénicas / Effects of the culture medium and the methodology applied on the biofilm formation of 2 diarrheagenic Escherichia coli strains

La capacidad de formar biopelículas de los microorganismos patógenos en gran variedad de ambientes, superficies y condiciones trae consigo un importante riesgo, tanto para la industria alimentaria como para la salud pública. Este trabajo tuvo como objetivo evaluar y comparar los efectos de la metodología empleada y de los medios de cultivo utilizados, sobre la capacidad de una cepa de Escherichia coli verotoxigénica no O157 y una enteropatogénica de formar biopelículas sobre una superficie de poliestireno. Se ensayaron 2 variantes metodológicas en cultivo estático y se utilizaron medios de cultivo con diferente composición. Los resultados mostraron que ambas cepas formaron una mayor cantidad de biopelícula en cultivo en LB suplementado con glucosa, con recambio del medio a las 24 h y la cuantificación de la biopelícula realizada a las 48 h de incubación. Dichas condiciones podrían ser utilizadas en futuros estudios sobre formación de biopelícula.

The ability to form biofilms of pathogenic microorganisms in a wide variety of environments, surfaces and conditions constitute an important risk, both for the food industry and for public health. The aim of this work was to evaluate and to compare the effects of the methodology applied and the culture medium used on the ability of a non-O157 verotoxigenic Escherichia coli strain and an enteropathogenic strain to form biofilm on polystyrene surface. Two methodological variants were tested in static culture and culture mediums with different composition were used. The results showed that both strains were able to form a greater biofilm under culture in LB supplemented with glucose, with medium replacement at 24 h and the quantification of the biofilm carried out at 48 h of incubation. These conditions could be used in future studies on biofilm formation.

Determinación de biopelículas y betalactamasas de espectro extendido en Vibrio cholerae no-O1, no-O139 aislados de pacientes con diarreas en Cuba / Determination of biofilms and extended-spectrum beta-lactamases in Vibrio cholerae non-O1, non-O139 isolates from patients with diarrhea in Cuba

. Vibrio cholerae no-O1, no-O139 es el tercer grupo de bacterias del género Vibrio que con más frecuencia producen diarreas. Sobrevive en los ambientes acuáticos, utilizando la formación de biopelícula como mecanismo de supervivencia que propicia la transmisión de la enfermedad diarreica. Desde 1977 se caracterizan aislados de V. cholerae con resistencia múltiple, y algunos de los mecanismos involucrados incluyen la producción de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE). Este trabajo tuvo como objetivo determinar la formación de biopelícula en los aislados cubanos de V. cholerae no-O1, no-O139, causantes de enfermedad diarreica aguda (EDA), y detectar la producción de BLEE en aquellos con resistencia total e intermedia a ampicilina. Se realizó un estudio descriptivo de corte transversal, entre enero 2014 y junio 2015. Se estudiaron 55 aislados caracterizados previamente, que formaban parte del cepario del Laboratorio Nacional de Referencia de EDA del Instituto Pedro Kourí. Para la determinación fenotípica de BLEE se estudiaron 43, de los que ya se conocía su susceptibilidad a ampicilina. El 54,5 por ciento de los aislados resultaron positivos a la formación de biopelícula, y predominaron los clasificados como formadores moderados (46,6 por ciento ) y débiles (36,6 por ciento ). De los 34 resistentes a ampicilina, 26,5 por ciento resultaron positivos a la producción de BLEE. En el caso de los nueve aislados con resistencia intermedia a ampicilina, 44,4 por ciento resultaron positivos. Los resultados del presente estudio contribuyen al conocimiento sobre la capacidad que tienen de persistir en el ambiente y permiten profundizar sobre los mecanismos de resistencia a los antimicrobianos(AU)

Vibrio cholerae non-O1, non-O139 is the third bacterium group from the genus Vibrio most commonly causing diarrhea. It survives in aquatic environments, using the formation of biofilm as a survival mechanism facilitating the transmission of diarrheal disease. Multi-drug resistant V. cholerae isolates have been characterized since the year 1977, and some of the mechanisms involved include the production of extended-spectrum β-lactamases (ESBLs). The purpose of the study was to determine the formation of biofilm in Cuban isolates of V. cholerae non-O1, non-O139 causing acute diarrheal disease (ADD), and detect the production of ESBLs in those with total or intermediate resistance to ampicillin. A descriptive cross-sectional study was conducted from January 2014 to June 2015. The study sample was 55 previously characterized isolates obtained from the strain collection at the ADD National Reference Laboratory of Pedro Kourí Institute. For phenotypic determination of ESBLs, 43 were studied which were known to be susceptible to ampicillin. 54.5 percent of the isolates tested positive for biofilm formation, with a predominance of those classified as moderate (46.6 percent) and weak (36.6 percent) biofilm producers. Of the 34 isolates resistant to ampicillin, 26.5 percent were positive for ESBL production. Of the 9 with intermediate ampicillin resistance, 44.4 % were positive. The results of the present study contribute knowledge about their ability to persist in the environment, and provide insight into antimicrobial resistance mechanisms(AU)

Effect of thymol and environmental factors on growth and biofilm formation by Listeria monocytogenes / Efecto del timol y factores ambientales sobre el crecimiento y formación de biopelícula por Listeria monocytogenes

Thymol (2-isopropyl-5-methylphenol) is an aromatic monoterpene found in essential oils extracted from plants belonging to the Lamiaceae family, such as Thymus, Ocimum, Origanum, Satureja, Thymbra and Monarda genera. Growth and biofilm formation by Listeria monocytogenes CLIP 74902 were evaluate using three carbon sources in the presence of thymol. Specific growth rate (h-1) values at 37o with glucose, trehalose and cellobiose with the addition of thymol (µg/mL) 0 (control) and 750, were respectively: 0.22, 0.07; 0.14, 0.04; 0.11, 0.04. Lag periods obtained under the same conditions were (h): 8.19, 13.2; 22.5, 27.5; 23.1, 28.1. A marked antibiofilm activity was observed against the exposure with 750 µg/mL of thymol, showing a high percentage of inhibition: glucose (99 %), trehalose (97 %) and cellobiose (98%), compared to the control. The results suggest that thymol could be used to inhibit the growth and production of biofilms by L. monocytogenes in the food industry.

Timol (2-isopropil-5-metilfenol) es un monoterpeno aromático presente en los aceites esenciales extraídos de plantas pertenecientes a la familia Lamiaceae, como los géneros Thymus, Ocimum, Origanum, Satureja, Thymbra y Monarda. El crecimiento y formación de biopelícula por Listeria monocytogenes CLIP 74902 fueron evaluados utilizando tres fuentes de carbono en presencia de timol. La velocidad específica de crecimiento (h-1) a 37o con glucosa, trehalosa y celobiosa con la adición de timol (µg/mL) 0 (control) y 750, fueron respectivamente: 0.22, 0.07; 0.14, 0.04, 0.11, 0,04. Los períodos lag obtenidos en las mismas condiciones fueron (h): 8.19, 13.2; 22.5, 27.5; 23.1, 28.1. Una marcada actividad antibiofilm fue obtenida con 750 µg/mL de timol, mostrando un alto porcentaje de inhibición con glucosa (99%), trehalosa (97%) y celobiosa (98%), respecto al control. Los resultados sugieren que timol podría ser usado para inhibir el crecimiento y producción de biopelículas por L. monocytogenes en la industria alimentaria.

Biopelícula en Staphylococcus aureus sensibles y resistentes a meticilina / Biofilm in methicillin sensitive and resistant Staphylococcus aureus

La formación de biopelícula es una estrategia de vida para la mayoría de las bacterias, ya que aumenta las posibilidades de transferencia de material genético y la resistencia a antibióticos, participa en la comunicación celular y ofrece protección en condiciones adversas y variables del medio ambiente; lo que contribuye a una colonización exitosa del hospedador. Esta investigación se propuso determinar la capacidad de producir biopelícula en aislamientos de S. aureus. Se estudiaron 30 aislados (13 sensibles y 17 resistentes a meticilina) mediante ensayo sobre microplacas de cultivos celulares. Todas las cepas mostraron patrones de adherencia; 24 (80%), 4 (13%) y 2 (7%) exhibieron grados de adherencia moderado, débil y fuerte, respectivamente. 77% de las cepas sensibles resultaron moderadamente productoras, 13% débiles y 7% fuertes productoras de biopelícula. Las cepas resistentes presentaron mayormente moderada producción (82%) y el 18% débil producción. No hubo asociación entre el grado de adherencia y la susceptibilidad a la meticilina. La alta tasa de producción de biopelícula en cepas clínicas de S. aureus, sensibles y resistentes a meticilina, sugiere el peligro potencial que representan dichas cepas dentro y fuera de ambientes hospitalarios, dada la importancia que juegan las biopelículas en el desarrollo de infecciones crónicas.

The formation of biofilm is a life strategy for most bacteria, since it increases the possibilities of transfer of genetic material and resistance to antibiotics, participates in cellular communication and offers protection in adverse and variable environmental conditions; what contribute to a successful colonization of the host. This research aimed to determine the capacity to produce biofilm in isolates of S. aureus. Thirty isolates (13 sensitive and 17 resistants to methicillin) were studied by assay on cell culture microplates. All strains showed adherence patterns; 24 (80%), 4 (13%) and 2 (7%) exhibited degrees of moderate, weak and strong adhesion, respectively. 77% of sensitive strains were moderately productive, 13% weak and 7% strong producers of biofilm. The resistant strains presented a moderate production (82%) and 18% a weak production. There was no association between the degree of adherence and the susceptibility to methicillin. The high rate of biofilm production in clinical strains of S. aureus, sensitive and resistant to methicillin, suggests the potential danger posed by such strains inside and outside hospital environments, given the importance that biofilms play in the development of chronic infections.

Biofilm fúngico asociado a dispositivo intravascular de larga permanencia: Complicaciones y dificultades terapéuticas / Fungal biofilm associated with long-term central venous access device: Complications and therapeutic difficulties

Las infecciones fúngicas asociadas a biofilms en dispositivos biomédicos son refractarias al tratamiento antifúngico y habitualmente se requiere del retiro oportuno del dispositivo, así como la administración de antifúngicos sistémicos. Presentamos el caso de una paciente mujer de 36 años que recibe terapia para el dolor administrada por dispositivo intravascular de larga permanencia, catéter Port-A-Cath, y que desarrolló candidemia y endocarditis por Candida parapsilosis asociada al catéter; el cual tuvo que ser retirado mediante toracotomía por persistencia de la infección a pesar de la terapia antifúngica sistémica. Se evidenció extenso biofilm rodeando al catéter, con aislamiento de Candida parapsilosis y se completaron seis semanas de tratamiento antifúngico con evolución clínica favorable

Fungal infections associated with biofilms in biomedical devices are refractory to antifungal treatment and usually require the timely removal of the device, as well as the administration of systemic antifungals. We present the case of a 36-year- old female patient who received pain therapy administered by a Port-A-Cath long-term central venous access device. She developed catheter-related candidemi a and endocarditis caused by Candida parapsilosis. The catheter had to be removed by thoracotomy due to persistent infection despite the systemic antifungal therapy. An extensive biofilm surrounding the catheter was observed and Candida parapsilosis was isolated. Six weeks of antifungal treatment with a favorable clinical evolution were completed